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絕緣子序列對穩定并增強基因表達的作用

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絕緣子序列對穩定并增強基因表達的作用

發布日期:2020-11-07 作者: 點擊:

  絕緣子序列通常位于啟動子和調控元件之間,具有隔絕其他調控元件對基因的活化或失活效應的功能。在轉基因產品開發時,如果能夠在插入位置兩側加入絕緣子序列,則可以起到穩定外源基因表達、降低位置效應的作用。在植物中應用Z廣泛的絕緣子序列就是核骨架/核基質結合區(S/MAR)。

  為了挖掘測試有價值的絕緣子序列,研究人員找到了4個絕緣子序列,分別是煙草根特異基因Rb7附近的MAR序列,雞溶菌酶MAR序列(chiMARs),矮牽牛轉化加速序列TBS和擬南芥第四染色體中的MAR序列(AtS/MAR10),其中前3個絕緣子序列之前有過研究。將包含這些絕緣子序列的測試載體轉化擬南芥,并測定外源基因表達。結果顯示,4個絕緣子序列均能夠增強外源基因表達,而只有AtS/MAR10序列還能夠降低基因表達的變動幅度。

  研究人員還利用全基因組測序的方法分析了側翼包含絕緣子的T-DNA序列的整合情況,發現chiMARs能夠有效的保護T-DNA的插入不受到周圍染色質抑制信號的影響。此外,研究者還發現,在含有絕緣子的轉化體中,T-DNA區截短和載體骨架插入的頻率更高,這表明右邊界RB的插入精準度有所降低,不過基因的表達并未因此受到影響。綜合所有結果,Rb7序列在增強表達上效果Z好,AtS/MAR10序列在降低表達變動幅度上效果Z好。

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